胡安娜一世在卡斯蒂利亚的统治中面临了以下挑战：
精神健康问题：胡安娜一世被宣布为精神错乱，这导致她对国家政策几乎没有影响。她被其父亲下令关在托德西亚斯的圣克拉拉皇家修道院[1]。由于她的精神健康问题，她无法有效地管理国家事务。
权力斗争：胡安娜的父亲斐迪南二世和丈夫菲利普一世在她统治期间进行了权力斗争。1506年菲利普一世驾崩后，斐迪南成为卡斯蒂利亚摄政，并以胡安娜精神失常为由将其关在修道院里[2]。
王位继承问题：胡安娜的母亲是葡萄牙公主，她向葡萄牙国王阿丰索五世求援，后者对吞并卡斯蒂利亚有浓厚兴趣，并宣布和胡安娜结婚。这导致了与葡萄牙的紧张关系和潜在的战争威胁[3]。
贵族和民众的不信任：由于胡安娜的母亲若阿纳曾经出轨生下了两个男孩，当时的卡斯蒂利亚贵族中存在对胡安娜是否为恩里克四世亲生女儿的怀疑，这影响了她的合法性和权威[4]。
这些挑战共同导致了胡安娜一世在卡斯蒂利亚的统治困难重重，她未能有效地行使权力，最终导致了国家的不稳定和混乱。
[1] 胡安娜(卡斯蒂利亚) - 维基百科 [2] 西班牙历史- 维基百科，自由的百科全书 [3] 卡斯蒂利亚王位继承战争_百度百科 [4] 带你一次性搞懂世界历史——西班牙篇 - 网易